在既有的各類(lèi)方法中，測(cè)序( sequencing)對(duì)突變的檢測(cè)相對(duì)準(zhǔn)確，但耗時(shí)、費(fèi)力，旦花費(fèi)高。目前出現(xiàn)了一種新興的、針對(duì)人群中大規(guī)模突變檢測(cè)的測(cè)序方法——多重PCR測(cè)序法(multiplex PCR sequencing)。多重PCR測(cè)序的原理是將待測(cè)基因切割成數(shù)百個(gè)堿基大小；同時(shí)在一組反應(yīng)管中進(jìn)行20～40個(gè)PCR反應(yīng)及脫氧測(cè)序反應(yīng)；然后將含有20～40組序列的終止反應(yīng)池上樣到測(cè)序膠的單組泳道上；電泳分離后轉(zhuǎn)到尼龍膜上，用片段專(zhuān)一性的寡核苷酸探針和膜雜交，讀出相應(yīng)的PCR片段序列。原始反應(yīng)池中有多少PCR反應(yīng)就雜交并洗脫多少次，以用于閱讀分析有的序列。此方法的優(yōu)勢(shì)是從一塊膠上可以取得更多的測(cè)序信息，信息量提高20～40倍，并避免了以往發(fā)現(xiàn)突變后再進(jìn)行測(cè)序的 “兩步走”過(guò)程。20重PCR同時(shí)測(cè)序的方法已很可靠、成熟并被用于常規(guī)研究中，β-肌漿球蛋白全序列測(cè)定及所含突變的鑒定是對(duì)該技術(shù)的最初檢驗(yàn)。多重PCR測(cè)序針對(duì)眾多個(gè)體的橫向檢測(cè)，將隨著自動(dòng)測(cè)序的介入，使其速度和精確度得到進(jìn)一步的提高。
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